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基因芯片技術(shù)知識概要
生物芯片,簡單地說就是在一塊指甲大小(1cm3)的有多聚賴氨酸包被的硅片上或其它固相支持物(如玻璃片、硅片、聚丙烯膜、*纖維素膜、尼龍膜等,但需經(jīng)特殊處理。作原位合成的支持物在聚合反應(yīng)前要先使其表面衍生出羥基或氨基(視所要固定的分子為核酸或寡肽而定)并與保護基建立共價連接;作點樣用的支持物為使其表面帶上正電荷以吸附帶負(fù)電荷的探針分子,通常需包被以氨基硅烷或多聚賴氨酸等)將生物分子探針(寡核苷酸片段或基因片段)以大規(guī)模陣列的形式排布,形成可與目的分子(如基因)相互作用,交行反應(yīng)的固相表面,在激光的順序激發(fā)下標(biāo)記熒光根據(jù)實際反應(yīng)情況分別呈現(xiàn)不同的熒光發(fā)射譜征,CCD相機或激光共聚焦顯微鏡根據(jù)其波長及波幅特征收集信號,作出比較和檢測,從而迅速得出所要的信息。生物芯片包括基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、組織芯片。而基因芯片中,zui成功的是DNA芯片,即將無數(shù)預(yù)先設(shè)計好的寡核苷酸或cDNA在芯片上做成點陣,與樣品中同源核酸分子雜交的芯片。
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