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    小鼠ELISA試劑盒抗原C(HLA-C)酶聯(lián)免疫分析說(shuō)明書(shū)

    發(fā)布時(shí)間: 2013-09-17  點(diǎn)擊次數(shù): 693次

    小鼠ELISA試劑盒品名稱:
    通用名:人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
    使用目的:
      本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)含量。
    實(shí)驗(yàn)原理
      本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)水平。用純化的人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C),再與HRP標(biāo)記的HLA-C抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)濃度。
    小鼠ELISA試劑盒標(biāo)本要求
    1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
    2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
    小鼠ELISA試劑盒操作步驟
    標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為120μg/L,80μg/L ,40μg/L,20μg/L, 10μg/L)。
    加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混

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