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近日有一位實(shí)驗(yàn)新手提出疑問:細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)黑點(diǎn)是什么情況?是不是被污染了?此問題也是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的常見問題之一,我公司技術(shù)員針對此問題解析道:
一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。
而如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
1. 細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘??;
2. 血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;
3. 配制培養(yǎng)基的ph值偏高,不宜細(xì)胞生長;
4. 配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
5. 培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
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